Colilert 18 procedura
Colilert 18 kvantitativna procedura za uzorke od 100 ml
Korak 1
Dodati reagens u uzorak
Korak 2
Usuti uzorak u Quanti-Tray (raspon brojanja 1–200) ili Quanti-Tray 2000 (raspon brojanja 1–2,419).
Korak 3
Zavariti” Quanti-Tray tacnicu korišćenjem Sealer-a i inkubirati je na 36.0±2.0°C tokom 18 časova.
Korak 4
Očitavanje rezultata se vrši prvo pod dnevnim svetlom. Žuto obojeni bazenčići ukazuju na prisustvo ukupnih koliforma. Nakon toga se vrši očitavanje pod UV lampom. Bazenčići koji su žuti i koji fluoresciraju pod UV lampom označavaju detekciju E.coli.
Quanty-Tray & Quanty-Tray 2000
Quanti-Tray tacnice imaju 51 bazenčić i njihov raspon brojanja je od 1 do 200. Quanti-Tray 2000 tacnice imaju 97 bazenčića, raspon brojanja je od 1 do 2419. Rezultati se očitavaju iz priloženih MPN tabela.
Kako Colilert testovi rade?
Colilert testovi koriste Defined Substrate Technology (tehnologija definisanog supstrata DST) nutrijent indikatore ONPG i MUG za detekciju ukupnih koliforma i E. coli.
Koliformi koriste enzim β-galaktozidazu da bi metabolizovali ONPG i promenili ga od bezbojnog u žuto.
E.coli korišćenjem β-glukuronidaze metobolišu MUG i stvaraju fluorescenciju.
Ovakav pristup se razlikuje od koncepta primenjenog kod tradicionalnih podloga koje obezbeđuju ambijent bogat nutrijentima te stimulišu rast kako ciljanih mikroorganizama tako i mikroorganizama koji nisu predmet testiranja pa tako svojim prisustvom dovode do lažno pozitivnih rekcija. Rast drugih mikroorganizama može takođe dovesti do supresije ciljnih mikroorganizama te dovesti do lažno negativnog rezultata na tradicionalnim podlogama. Za supresiju ne-ciljnih mikroorganizama, tradicionalne podloge često uključuju visoke nivoe soli, deterdženata, ili drugih selektivnih agenasa—koji opet mogu izvršiti supresiju ciljnih mikroorganizama te dalje dovesti do lažno negativnih rezultata.
Svi IDEXX DST* reagensi se mogu koristiti za kvalitativne i u kvantitativne testove uz P/A posudice (“ima –nema”) ili Quanti-Tray®, ili Quanti-Tray®/2000 tacne za kvantifikaciju.
*Colilert 250, Enterolert 250 i Pseudalert 250 se koriste za flaširane vode te je kod njih predviđen protokol samo za kvalitativno testiranje.